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Denja Muster

Streptococcus pneumoniae ist ein wichtiger menschlicher Erreger, der für Krankheiten wie Lungenentzündung und Meningitis verantwortlich ist, die durch signifikante Entzündungsreaktionen gekennzeichnet sind [1]. Solche Reaktionen sind mit der Freisetzung von Zytokinen einschließlich CXCL8, auch bekannt als Interleukin (IL)-8 sowie IL-6, IL-1, Granulozyt-Makrophagen-Kolonie stimulierende Faktor (GM_CSF), Transforming Growth Factor (TGF) und [2] verbunden. Die Auslösung einer Entzündungsreaktion kann auf wechselwirkungen Zwischenzellen und mehrere verschiedene bakterielle Faktoren zurückzuführen sein. Epithelzellen der Atemwege exprimieren Mustererkennungsrezeptoren (PRRs) wie Toll-like Receptors (TLRs) 2–6 mit TLR2, das bakterielle Faktoren wie Peptidoglykan und Lipoteichosäure erkennt [3]. Epithelzellen, die TLRs exezieren, können CXCL8 während einer Atemwegsinfektion freisetzen, die chemotaktische Aktivität für Neutrophile und Monozyten hat [4]. Die angeborene Immunität besteht auch aus antimikrobiellen Effektoren, einschließlich antimikrobieller Peptide, die sich gegen S. pneumoniae als wirksam erwiesen haben [5]. Liposomen (1 mg oder 100 g) reduzierten die CXCL8-Konzentration von menschlichen Nasopharyngealepithelzellen, die durch verschiedene Pneumokokkenstämme induziert wurden. Die gezeigten Werte sind Mittel von drei unabhängigen Experimenten und sind die Werte mit 1 mg oder 100 g Liposomen, ausgedrückt als Prozentsätze der CXCL8-Konzentrationen, die in Ermangelung von Liposomen in Gegenwart von wilden klinischen Isolaten erhalten wurden. Liposomen reduzierten die CXCL8-Antwort auf alle getesteten Pneumokokkenstämme.

Zahlen in Klammern geben Serotypen an. Fehlerbalken zeigen Standardabweichung Bentley S, Aanensen D, Mavroidi A, Saunders D, Rabbinowitsch E, Collins M, Donohoe K, Harris D, Murphy L, Quail M, et al. Genetische Analyse des kapselförmigen biosynthetischen Lokus aus allen 90 pneumokokken Serotypen. PLoS Genet. 2006;2:e31. Im Gegensatz zu den anderen wilden klinischen Isolaten in dieser Studie wurde der Stamm P21, Serotyp 3, in einem Tiermodell durchgegangen und hat eine extrem dicke Kapsel. Mit dem gleichen Protokoll wie für die Stämme in Abb. 1 und 2 fanden wir keine Induktion der CXCL8-Freisetzung durch Stamm P21 (Abb. 3a). Die Behandlung mit dem lytischen Antibiotikum Ceftriaxon ermöglichte jedoch den Stamm P21, um eine CXCL8-Reaktion zu induzieren, die durch das Vorhandensein von Liposomen reduziert wurde (Abb. 3b).

BMC Mikrobiologie Band 16, Artikelnummer: 154 (2016) Zitieren Sie diesen Artikel Die Bakterien wurden über Nacht auf CSBA-Platten bei 37 °C bei 5 % CO2 angebaut und dann über Nacht in 5 ml BHI mit 5 % FCS kultiviert. 1 ml Übernachtungskultur wurde 5 ml BHI + FCS zugegeben und bis OD600nm 0,4 subkultiviert. Die Bakterien wurden dann bei 5000 x g für 10 min bei Raumtemperatur zentrifugiert und in 100 l PBS resuspendiert. Um Hämolysine aus den Bakterien zu befreien, wurden sie 5 min auf Eis beschallt. In einer rund-bodenigen 96-Well-Platte (Sarstedt, NC, USA) wurde 50 l PBS (pH 7,4) pro Brunnen zusammen mit 50 l bakteriellem Schallat oder 50 l Pneumolysin (2 mg/ml, als Positivkontrolle) und Verdoppelung stagniert.

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